一、服務(wù)簡介

掃描電鏡：電子束到達(dá)樣品，激發(fā)樣品中的二次電子，二次電子被探測器接收，通過信號處理并調(diào)制顯示器上一個像素發(fā)光，由于電子束斑直徑是納米級別，而顯示器的像素是100微米以上，這個100微米以上像素所發(fā)出的光，就代表樣品上被電子束激發(fā)的區(qū)域所發(fā)出的光。實(shí)現(xiàn)樣品上這個物點(diǎn)的放大。如果讓電子束在樣品的一定區(qū)域做光柵掃描，并且從幾何排列上一一對應(yīng)調(diào)制顯示器的像素的亮度，便實(shí)現(xiàn)這個樣品區(qū)域的放大成像。即掃描電子顯微鏡（SEM），利用極狹窄的電子束去掃描樣品，進(jìn)而通過電子束與樣品的相互作用產(chǎn)生各種效應(yīng)，原理即為利用二次電子信號成像來觀察樣品的表面形態(tài)，常用于物質(zhì)表面及斷面立體結(jié)構(gòu)的觀察。

二、技術(shù)流程

1. 清洗：一般用pH7.2磷酸鹽緩沖

2. 固定：常規(guī)法用2.5﹪戊二醛前固定24h（放入0－4℃冰箱中）即可。一些特殊樣品，如幼嫩的、含水量高的樣品最好還是用四氧化鈉后固定2h

3. 脫水：乙醇系列30﹪－50﹪－70﹪－85﹪－95﹪－100﹪（2次）逐級脫水，每級10-15min，塊大的應(yīng)適當(dāng)搖動，保 證脫水干凈

4. 中間液代換：分兩步。第一步用醋酸(異)戊酯：乙醇＝1：1的混合液浸泡10min，第二步用醋酸異戊酯浸泡10min，適當(dāng)搖動

5. 臨界點(diǎn)干燥：代換后的樣品轉(zhuǎn)入樣品籃中，放進(jìn)預(yù)冷的臨界點(diǎn)干燥儀樣品室內(nèi)，蓋好室蓋后注入液體二氧化碳，以淹沒 樣品為準(zhǔn)，先升溫至15℃加熱10min，再升溫至35℃讓其氣化，觀察液體全氣化后慢慢放氣，必須待氣放盡才能開蓋取樣

6. 粘貼樣品：一般樣品可用雙面膠帶粘貼，如果樣品塊大，導(dǎo)電性差，必須用導(dǎo)電膠粘貼

7. 鍍膜后入鏡觀察

送樣要求信息：

·組織樣本

需要量：將組織切成 1 立方毫米左右小塊（掃描電鏡取材可稍大于該標(biāo)準(zhǔn)） 固定于 2.5%戊二醛固定液 ；

運(yùn)輸：4度冰袋運(yùn)輸；

·細(xì)胞樣本

細(xì)胞直接刮下， 細(xì)胞懸液直接離心， 棄上清， PBS 清洗 2 次， 離心成團(tuán)， 加入 2.5%戊二醛固定液固定；

運(yùn)輸：4度冰袋運(yùn)輸；

·微生物細(xì)菌樣本

參照細(xì)胞樣本，菌液離心后固定于戊二醛溶液，4度運(yùn)輸

四、成果展示

感謝您選擇我公司的掃描電鏡服務(wù)。如有相關(guān)問題請聯(lián)系我們的工作人員。