服務簡介

慢病毒( Lentiviruses)屬于逆轉錄病毒科。慢病毒核蛋白質前整合復合物具有噬核特性，病毒基因組運輸至細胞核，從而使慢病毒可以感染和在非有絲分裂細胞中復制。這一特性使得慢病毒成為基因治療的常用轉移載體，慢病毒載體對分裂細胞和非分裂細胞均具有感染能力，病毒基因組整合于宿主基因組，可長時間、穩定表達外源基因。

  慢病毒載體（Lentiviral vector）較逆轉錄病毒載體有更廣的宿主范圍，慢病毒能夠有效感染非周期性和有絲分裂后的細胞。慢病毒載體能夠產生表達siRNA的高滴度的慢病毒，在周期性和非周期性細胞、干細胞、受精卵以及分化的后代細胞中表達siRNA/miRNA，實現在多種類型的細胞和轉基因小鼠中特異而穩定的基因表達的功能性沉默，為在原代的人和動物細胞組織中快速而高效地研究基因功能，以及產生特定基因表達降低的動物提供了可能性

 技術流程

  1、含目的基因的慢病毒載體的構建和純化提取；

  2、慢病毒表達載體PLVX，骨架質粒PLD2、PLD3，在脂質體LP2000作用下，三質粒共轉染293T細胞；

  3、培養48~72h，收集培養上清；

  4、病毒的純化和濃縮（超離和/或超濾）；

  5、滴度測定、目的基因檢定；

  6、將制得的慢病毒液轉導客戶的靶細胞，篩選混合穩定細胞株，并檢測靶基因的表達

  1、所要表達的外源基因名稱或序列和所要選擇的穿梭載體

  2、提供重組后的慢病毒載體質粒

  3、附上重組成功的酶切鑒定結果及對目的基因的PCR鑒定結果。

 成果展示

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