一、服務簡介

      Western免疫印跡（Western Blot）是將蛋白質轉移到膜上，然后利用抗體進行檢測的方法。對已知表達蛋白，可用相應抗體作為一抗進行檢測，對新基因的表達產物，可通過融合部分的抗體檢測。 與Southern或Northern雜交方法類似，但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝膠電泳，被檢測物是蛋白質，“探針”是抗體，“顯色”用標記的二抗。

      經過PAGE分離的蛋白質樣品，轉移到固相載體（例如硝酸纖維素薄膜）上，固相載體以非共價鍵形式吸附蛋白質，且能保持電泳分離的多肽類型及其生物學活性不變。以固相載體上的蛋白質或多肽作為抗原，與對應的抗體起免疫反應，再與酶或同位素標記的第二抗體起反應，經過底物顯色或放射自顯影以檢測電泳分離的特異性目的基因表達的蛋白成分。該技術也廣泛應用于檢測蛋白水平的表達。

二、技術流程

1、提取細胞或組織蛋白、并進行蛋白含量；

2、制備SDS-PAGE膠；

3、蛋白樣品變性、電泳；

4、電泳轉膜；

4、封閉；

5、加一抗，TBST洗滌；

6、HRP標記的二抗BST洗滌；

7、ECL試劑作用；

8、X-光片曝光、顯影或化學發光；

9、結果分析

1、組織樣本

  需要量：每個樣本至少100mg；

  運輸：干冰運輸

2、細胞樣本

  需要量：每個檢測樣本需提供至少5*10^5細胞量（可做3條帶）；

  運輸：25T細胞培養瓶，灌滿培養基新鮮運輸或提供細胞凍存管，干冰運輸       

3、提好的蛋白

  運輸：干冰運輸

4、一抗

  運輸：依據說明書，一般4℃或-20℃運輸，嚴禁反復凍融

5、蛋白定量結果（見交付實驗報告或者交付的Excel）；

6、灰度值分析結果（Excel ）；

7、膜電泳曝光圖（jpg/png/ppt）

五、詢價及訂購

感謝您選擇我公司的western-blot檢測服務。如有相關問題請聯系我們的工作人員。